Ponorná metoda mikroskopického pozorování zahrnuje zavedení speciální kapaliny mezi čočku zařízení a studovaný objekt. Zvyšuje jas a rozšiřuje rozsah zvětšení obrazu. Objekt tak lze výrazně přiblížit a zkoumat jeho nejmenší prvky bez změny vybavení. Podle toho se kapalina nazývá imerze. Může sloužit jako různé kompozice. Nejoblíbenější je imerzní olej. Zvažte jeho vlastnosti podrobněji.
Obecné informace
Prvním imerzním olejem pro mikroskopii byl cedr. Mělo to však jednu podstatnou nevýhodu. Postupem času se jeho vlastnosti změnily a neumožňovaly získat požadované výsledky. Na volném vzduchu začala kapalina postupně kondenzovat (až ztvrdnout). V souladu s tím se také změnil index lomu. Ve 20. století se začal vyrábět syntetický imerzní olej. Tato tekutina neměla výše uvedený nedostatek.
Normy imerzního oleje
Klíčparametry kapaliny jsou stanoveny v GOST 13739-78. Podle normy má imerzní olej:
- index lomu nd=1,515±0,001;
- propustnost ve spektrálním rozsahu od 500 do 700 nm s tloušťkou vrstvy 1 mm - 95 %, od 400 do 480 nm - 92 %;
Optimální teplota, při které lze imerzní olej používat, je 20 stupňů. Existují také mezinárodní standardy. Podle ISO 8036/1 je index lomu 1,518 + 0,0005 a propustnost ve vrstvě 10 mm pro spektrální rozsah od 500 do 760 nm je 95 % a při 400 nm je 60 %.
Uvedené parametry odpovídají nefluorescenčnímu imerznímu oleji. Norma ISO 8036-1/2 definuje vlastnosti kapaliny pro luminiscenci. Propustnost ve spektrálním rozsahu od 500 do 700 nm ve vrstvě 10 mm je 95 %, od 365 do 400 nm - 60 %.
Potíže s nesrovnalostmi parametrů
Zjistitelný rozdíl ve výše uvedených normách může mít za následek zhoršení výkonu konkrétní čočky při použití nevhodné kapaliny. Výsledek:
- Kontrast je snížen kvůli sférické aberaci.
- Pole na výzkumném objektu je barevné.
- Osvětlení v rovině studovaného objektu a v oblasti jeho tvorby obrazu se stává nerovnoměrným.
- Obraz bude rozmazaný.
Nuance
Optické mikroskopy mají horní mez rozlišenío něco více než 100krát. Při této úrovni zvětšení by mělo být osvětlení studovaného objektu vysoce kvalitní. V opačném případě bude výsledný obraz tak tmavý, že objekt nebude vidět. Mezi krycím sklem a objektivem totiž dochází k lomu a rozptylu světla. Imerzní olej přispívá k jeho většímu zachycení. V důsledku toho bude obraz jasnější.
Vlastnosti lomu světla
Jak získáte jasný obrázek? V různých médiích dochází k lomu světla různými způsoby. Například úhly lomu paprsků ve vzduchu a ve skle jsou různé. V prvním případě je indikátor 1,0, ve druhém - 1,5. Toto je hlavní problém.
Použití oleje umožňuje snížit index lomu paprsků, které procházejí studovaným objektem. Faktem je, že kapalina má stejný parametr jako sklo. V důsledku toho se mezi sklíčkem a čočkou vytvoří homogenní médium a většina světla procházejícího objektem se dostane do přístroje. Výsledkem je jasný obraz.
Technické body
Tubusy imerzních objektivů jsou zpravidla vyryty olejem. Samotný prvek se používá, když je potřeba clona 1,0 nebo více. Takové "ponorné" čočky se používají pro přímé ponoření do kapaliny. V tomto ohledu jsou zcela utěsněny. To poskytuje vysokou ochranu proti poškození čoček olejem.
Klasifikace
Oleje se používají v praxidvě viskozity: vysoká (typ B) a nízká (A). Na obalu často najdete informace o indexu lomu. Vyrábí například imerzní olej (100 ml), jehož index lomu je 1,515. Kapaliny s nízkou viskozitou jsou aplikovány do vzduchového prostoru as vysokou viskozitou - společně s kondenzátory.
Podmínky použití
Abyste získali jasný obraz studovaného objektu, musíte se řídit poměrně jednoduchými doporučeními:
- Najděte zkoumaný objekt na posuvníku ve středu pole s malým zvětšením. K tomu se používá čočka s malým zvětšením.
- Otočte věžičkou.
- Uveďte čočku 100x do pracovní polohy.
- Kapněte kapku oleje na sklíčko, druhou na čočku.
- Upravte pracovní vzdálenost pomocí jemného zaostření, dokud nebude objekt jasně viditelný.
Při práci je třeba dávat pozor. Je důležité zabránit vniknutí vzduchu mezi krycí sklíčko a objektiv.
Imerzní olej "Minimed"
Kapalina se používá při práci s achromatickými a apochromatickými čočkami jakéhokoli typu zařízení, kromě luminiscenčních. Podle odborníků, kteří tento imerzní olej používali, má několik užitečných vlastností. Kapalina výrazně zlepšuje viditelnost objektu, minimalizuje odlesky, ztráty světla a optické aberace. Použití oleje výrazně rozšiřuje rozsah schopností zařízení.
Úklidvybavení
Po práci s imerzním olejem je nutné dát zařízení do pořádku. Čištění by mělo být provedeno před zaschnutím čočky. Čistý papír na čočky se používá k odstranění zbytků oleje. K čištění všech skleněných povrchů se používá válcovaný plech. Papír na čočky by měl být navlhčen roztokem na čočky a měl by se odstranit veškerý zbývající olej.
Historické pozadí
Prvním vědcem, který vysvětlil mechanismus ponoření, byl Robert Hooke. V roce 1678 vyšla jeho kniha Microscopium, ve které byla uvedena všechna vysvětlení. V roce 1812 bylo navrženo ponoření jako prostředek ke korekci aberací čočky. Autorem myšlenky byl David Buster. Kolem roku 1840 byly vyrobeny první imerzní čočky. Jejich tvůrcem byl D. B. Amici. Zpočátku výzkumníci používali jako imerzní kapalinu anýzové oleje. Index lomu se blížil indexu lomu skla.
